組織總磷含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC2850
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：強腐蝕性，強氧化性；易揮發(fā)，不使用時請及時蓋緊蓋子；

2. 試劑三A：臨用前加入10mL蒸餾水溶解，用不完的試劑2-8℃保存4周；

3. 試劑三B：臨用前加入10mL蒸餾水溶解，用不完的試劑2-8℃保存4周；

4. 試劑三：臨用前按試劑三A：試劑三B：試劑二=1:1:1的體積比例配制，配好的試劑三應(yīng)為淺黃色。若無色則試劑失效，若是藍(lán)色則為磷污染，試劑三根據(jù)樣本量現(xiàn)用現(xiàn)配，限當(dāng)天使用。

5. 標(biāo)準(zhǔn)品：10mmol/L磷標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明：
磷的存在形態(tài)包括無機磷與有機磷。無機磷主要指磷酸根，參與生物體內(nèi)多種代謝，包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等。通過測定總磷與無機磷含量即可了解作物對磷的利用率，進而為合理施肥提供依據(jù)。
總磷經(jīng)消化后，轉(zhuǎn)化成無機磷。鉬藍(lán)法是測定無機磷含量的經(jīng)典方法，一定條件下，鉬藍(lán)與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì)，通過測定660nm光吸收，即可計算無機磷含量，進而可計算出組織中總磷含量。
Inorganic Phosphate + Ammonium Molybdate            Phosphomolybdate Blue (660nm)
技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0585 mmol/L
線性范圍：0.0625-2 mmol/L
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿、蒸餾水和濃硫酸（99%）。


操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
實驗實例：

1. 取0.1g小鼠腎臟按照提取步驟操作，離心取上清之后按照測定步驟操作，測得計算A測定=0.273，A空白=0.016，A標(biāo)準(zhǔn)=0.429，按樣本質(zhì)量計算總磷含量得：

總磷含量(mmol/g 質(zhì)量)= 0.005×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W= 0.031 mmol/g質(zhì)量。

1. 取0.1g小鼠脾按照提取步驟操作，離心取上清之后按照測定步驟操作，測得計算A測定=0.268，A空白=0.016，A標(biāo)準(zhǔn)=0.429，按樣本質(zhì)量計算總磷含量得：

總磷含量(mmol/g 質(zhì)量)= 0.005×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W= 0.031 mmol/g質(zhì)量。
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