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中性轉(zhuǎn)化酶（NI）活性檢測(cè)試劑盒蔗糖
儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱(chēng)
中性轉(zhuǎn)化酶(NI)活性檢測(cè)試劑盒
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱(chēng)
Neutral Invertase(NI) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S

詢(xún)價(jià)留言

產(chǎn)品概述

品牌	SOLARBIO/索萊寶	CAS	詳詢(xún)
分子式	詳詢(xún)	純度	詳詢(xún)
分子量	詳詢(xún)	貨號(hào)	BC0570
規(guī)格	50T/24S	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	中性轉(zhuǎn)化酶活性測(cè)定	應(yīng)用領(lǐng)域	環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

中性轉(zhuǎn)化酶（NI）活性檢
測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào)：BC0570
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱(chēng)	規(guī)格	保存條件
提取液	液體50mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體60 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×1瓶	2-8℃保存
試劑三	液體35 mL×1瓶	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	粉劑×1瓶	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：臨用前加入30mL試劑一充分溶解備用；用不完的試劑4℃保存；
標(biāo)準(zhǔn)品：10mg葡萄糖，臨用前加入1mL蒸餾水溶解，制備10mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液備用。

產(chǎn)品說(shuō)明：
蔗糖轉(zhuǎn)化酶（Invertase，Ivr）催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH，將高等植物Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶（AI）和中性轉(zhuǎn)化酶（NI）兩種類(lèi)型。NI主要存在于細(xì)胞質(zhì)中，負(fù)責(zé)分解細(xì)胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。
NI催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖，進(jìn)一步與3,5－二硝基水楊酸反應(yīng)，生成棕紅色氨基化合物，在540nm有特征光吸收，在一定范圍內(nèi)540nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過(guò)光吸收增加速率來(lái)計(jì)算NI活性。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng)：
1、如果加入試劑三，煮沸10min后有混濁物出現(xiàn)，建議離心除去沉淀后，取上清測(cè)定吸光度。
2、如果吸光值大于1，可以用蒸餾水將樣本稀釋后測(cè)定（計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)）。
3、由于提取液中含有一定濃度的蛋白（約1mg/mL），所以在測(cè)定樣本蛋白濃度時(shí)需要減去提取液本身的蛋白含量。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

取0.1g冬青加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照步驟操作，測(cè)得計(jì)算A測(cè)定=0.778，A對(duì)照=0.774，ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照=0.778-0.774=0.004，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y = 0.9582x - 0.123，計(jì)算x=（0.004+0.123）/0.9582=0.13254，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得： NI活性（U/g 質(zhì)量）=33.3 ×x÷W =33.3 ×0.13254÷0.1=44.136 U/g 質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)：

Huang Y W, Nie Y X, Wan Y Y, et al. Exogenous glucose regulates activities of antioxidant enzyme, soluble acid invertase and neutral invertase and alleviates dehydration stress of cucumber seedlings[J]. Scientia horticulturae, 2013, 162: 20-30.

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