土壤速效鉀含量檢測試劑盒說明書

微量法

貨號：BC3045

規(guī)格：100T/48S

產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1、 提取液：若有晶體析出，37℃水浴溶解即可。

2、 試劑一：自備，甲醛。

3、 工作液：臨用前在1瓶試劑三B中加入2.805mL試劑三A，充分溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用，用不完的試劑2-8℃保存一周（每瓶配好的工作液可做37管樣本測定管試驗）。

4、 標準液：20 μmol/mL鉀標準液。

產品說明：

速效鉀是土壤中易被植物吸收利用的鉀素，是表征土壤鉀素供應狀況的重要指標之一。及時測定和了解土壤速效鉀的含量及其變化，對耕地地力評價及對指導鉀肥的施用有著重要作用。

鉀離子與四苯硼鈉作用，形成不溶于水的白色四苯硼鉀沉淀，產生的濁度在一定范圍內與鉀離子濃度成正比，通過檢測其在420nm處的濁度來測定土壤速效鉀的含量。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、振蕩器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、30-50目篩、甲醛（不允許快遞）、蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

新鮮土樣風干，過30-50目篩。按照土壤質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約0.2g土樣，加入1mL提取液），振蕩提取1h，10000rpm，25℃離心10min（若離心后上清中仍有雜質，建議將上清再次離心，至澄清），取上清液待測。

二、測定步驟

1、 分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節(jié)波長至420nm，分光光度計蒸餾水調零。

2、 臨用前將20 μmol/mL鉀標準液用提取液稀釋至1.2、1、0.8、0.6、0.4、0.3、0.2 μmol/mL的標準液待測。

3、 標準液稀釋可參考下表：

備注：實驗中每個標準管需要50μL標準液。

4、 在EP管或96孔板中進行以下操作（試劑一為有刺激性氣味的有毒物質，建議以下試驗在通風櫥中操作）：

三、速效鉀含量計算

1、標準曲線的繪制：根據標準管的濃度（x，μmol/mL）和吸光度ΔA標準（y，ΔA標準），建立標準曲線。根據標準曲線，將ΔA測定（y，ΔA測定）帶入公式計算樣本濃度（x，μmol/mL）。

2、速效鉀含量計算：

速效鉀含量（mg/kg）=x×10^-3 ×V樣總÷W×39=0.039x ÷W

10^-3：單位換算系數，1μmol=10^-3 mmol；V樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣本質量，kg；39：鉀離子的相對分子質量。

注意事項：

1、 提取液剛從低溫（4℃）條件取出會有晶體析出，震蕩使其溶解即可。

2、 甲醛為有刺激性氣味的有毒物質，建議本試驗在通風櫥中操作。

3、 當A測定大于1時，建議將樣本用提取液稀釋后再進行測定，計算時需在公式中乘以相應稀釋倍數；當A測定小于0.15時，建議適當增加土壤樣本質量或減少提取液重新提取后再進行測定。

實驗實例：

1、取0.2g土樣1加入1mL提取液，振蕩提取1h，取上清按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A測定-A對照=0.218-0.062=0.156，根據標準曲線y=0.7128x-0.0301，計算x =0.261μmol/mL，按樣本質量計算速效鉀含量得：速效鉀含量(mg/kg質量)=0.039x ÷W=0.039×0.261÷0.0002=50.895 mg/kg質量。

2、取0.2g土樣2加入1mL提取液，振蕩提取1h，取上清后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A測定-A對照=0.801-0.055=0.746。根據標準曲線y=0.7128x-0.0301，計算x =1.089μmol/mL，按樣本質量計算速效鉀含量得：速效鉀含量(mg/kg質量)=0.039x ÷W=0.039×1.089÷0.0002=212.355 mg/kg質量。

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